Продукти

Ефекти на детергентите върху активността на P-гликопротеин атпаза: разлики в смущенията на базалните и зависими от верапамил дейности.

P-гликопротеинът (P-gp), гликопротеин на плазмената мембрана, свързан с фенотипа на множествена лекарствена резистентност, е отговорен за ATP-зависимото изтичане на различни амфифилни лекарства.Използвайки мембранни везикули, приготвени от мултирезистентна клетъчна линия DC-3F/ADX, ние изследвахме смущението на базалната (т.е. в отсъствието на лекарство) и верапамил-зависимата активност на P-gp ATPase, индуцирана от различни детергенти, при неразтворими, както и при солюбилизиращи концентрации.Прогресивното разтваряне на мембраната с нарастваща концентрация на детергент се наблюдава чрез разсейване на светлината и експерименти с центрофугиране.За концентрации на неразтворими детергенти, всички тествани детергенти, с изключение на DOC, индуцират частично инхибиране на активността на P-gp ATPase, което не корелира с количеството на различните тествани детергенти, включени в мембраните.Анализът на индуцираното от верапамил P-gp активиране разкрива, че активността на P-gp ATPase се модулира по различен начин от различните детергенти при неразтворими концентрации.По този начин е по-вероятно да възникнат специфични взаимодействия между P-gp и детергенти, отколкото глобално смущение на мембраната.След разтваряне с различните тествани детергенти, основната активност на P-gp АТФ-аза беше практически напълно инхибирана, освен в присъствието на CHAPS, който успя да запази тази активност на ниво, сравнимо с това, измерено в естествени мембрани.Въпреки това, индуцираното от верапамил P-gp ATPase активиране се губи по време на разтваряне на P-gp от CHAPS, но се възстановява след разреждане на CHAPS под неговата критична мицеларна концентрация.Тези наблюдения показват специфични взаимодействия между P-gp и CHAPS молекули в смесените мицели.Като цяло, нашите данни, доказващи специфични взаимодействия P-gp/детергенти, са в съответствие с местоположението на местата за транспортиране на лекарства върху P-gp трансмембранни домейни.