Продукти

Над 70% от нискостепенните глиоми носят хетерозиготна R132H мутация в гена, кодиращ изоцитрат дехидрогеназа 1 (IDH1).Това придава на ензима новата способност да превръща α-кетоглутарат в 2-хидроксиглутарат, което в крайна сметка води до туморогенеза.Основният източник на производство на 2-хидроксиглутарат е глутаминът, който при рак също е източник на анаплероза на цикъла на трикарбоксилната киселина (TCA).Алтернативен източник на анаплероза е потокът на пируват чрез пируват карбоксилаза (PC), който е често срещан път в нормалните астроцити.Целта на това проучване е да се определи дали PC служи като източник на TCA анаплероза в IDH1 мутантни клетки, където глутаминът се използва за производството на 2-хидроксиглутарат. Изследвани са обезсмъртени нормални човешки астроцити, конструирани да експресират хетерозиготен мутант IDH1 или див тип IDH1.Потокът на пируват през PC и чрез пируват дехидрогеназа (PDH) беше определен чрез използване на магнитно-резонансна спектроскопия за изследване на маркирането на получен от [2-¹³C]глюкоза ¹3C-labe воден глутамат и глутамин.Анализи на активността, RT-PCR и Western blotting бяха използвани за изследване на експресията и активността на съответните ензими.Данните от Cancer Genome Atlas (TCGA) бяха анализирани, за да се оцени експресията на ензими в проби от човешки глиом. В сравнение с клетките от див тип, мутантните IDH1 клетки значително увеличиха фракционния поток през PC.Това беше свързано със значително увеличаване на активността и експресията на компютъра.Едновременно с това PDH активността значително намалява, вероятно медиирана от значително повишено инхибиторно PDH фосфорилиране от PDH киназа 3. В съответствие с наблюдението в клетките, анализът на данните от TCGA показва значително увеличение на PC експресията в мутантни проби от човешки глиом, експресиращи IDH, в сравнение с диви- тип IDH. Нашите открития показват, че промените в PC и PDH може да са важна част от клетъчната адаптация към мутацията IDH1 и могат да служат като потенциални терапевтични цели.