Продукти

Разработихме нова система за доставяне на малка интерферираща РНК (siRNA), използвайки троен комплекс с полиетиленимин (PEI) и γ-полиглутаминова киселина (γ-PGA), която показа заглушаващ ефект и липса на цитотоксичност.Бинарните комплекси на siRNA с PEI са приблизително 73-102 nm в размер на частиците и 45-52 mV в ζ-потенциал.Ефектът на заглушаване на комплексите siRNA/PEI се увеличава с увеличаване на PEI, а комплексите siRNA/PEI със съотношение на заряд над 16 показват значителен нокдаун на луцифераза в клетъчна линия на карцином на дебелото черво на мишка, експресираща редовно луцифераза (клетки Colon26/Luc).Въпреки това, силна цитотоксичност и аглутинация на кръвта се наблюдават в комплекса siRNA/Lipofectamine и комплекса siRNA/PEI16.Съобщава се, че презареждането на катионни комплекси с анионно съединение е обещаващ метод за преодоляване на тези токсичности.Затова подготвихме трикомпонентни комплекси от siRNA с PEI (съотношение на заряд 16) чрез добавяне на γ-PGA, за да намалим цитотоксичността и да достави siRNA.Както се очаква, цитотоксичността на тройните комплекси намалява с увеличаване на съдържанието на γ-PGA, което намалява ζ-потенциала на комплексите.Силен заглушаващ ефект, сравним с комплекса siRNA/Lipofectamine, беше открит в тройни комплекси, включително γ-PGA с анионен повърхностен заряд.Високото включване на тройни комплекси в клетки Colon26/Luc беше потвърдено с флуоресцентно микрокопие.След постигане на нокдаун на екзогенно трансфектиран ген, способността на комплекса да медиира нокдаун на ендогенен домакински ген, глицералдехид 3-фосфат дехидрогеназа (GAPDH), беше оценена в B16-F10 клетки.Тройният комплекс (siRNA/PEI16/γ-PGA12 комплекс) показва значителен нокдаун ефект на GAPDH.По този начин разработихме полезна система за доставка на siRNA.