Продукти

1. Методите за профилиране на метаболити са важни инструменти за измерване на метаболитни пулове в биологични системи.Докато повечето методи за профилиране на метаболитите отчитат относителни интензитети или зависят от няколко вътрешни стандарта, представящи всички метаболити, крайното изискване за количествено описание на метаболитния пул в биологичните клетки и течности е определянето на абсолютна концентрация.Тук докладваме високопроизводителен и чувствителен метод за профилиране на метаболит с тандемна газова хроматография/тандемна масспектрометрия (GC/MS/MS), позволяващ абсолютно количествено определяне на всички открити метаболити.Методът се основава на дериватизация на метил хлороформат и количествено определяне чрез добавяне на проби с метаболитни стандарти, отделно дериватизирани с деутерирани дериватизиращи реагенти.Традиционната йонизация с електронен удар се заменя с положителна химическа йонизация, тъй като последната запазва в много по-голяма степен молекулния йон и други фрагменти с високо молекулно тегло.Това направи по-лесно да се изберат уникални MS/MS преходи сред многото съвместни метаболити.Понастоящем новият GC/MS/MS метод включва 67 общи първични метаболита, повечето от които принадлежат към групите на амино и неамино органични киселини.Показваме приложимостта на метода върху проби от урина и серум.Методът е значително подобрение на настоящата методология за количествено GC/MS метаболитно профилиране на аминокиселини и неаминоорганични киселини.

2.24S-хидроксихолестерол (24OHC) и 27-хидроксихолестерол (27OHC) са два структурно подобни оксистерола с различен произход - първият се образува почти изключително в мозъка, а вторият се образува в по-малка степен в мозъка, отколкото в повечето други органи.ХИПОТЕЗА, КОЯТО ТРЯБВА ДА БЪДЕ ТЕСТВАНА: Увреждането на невроните и/или демиелинизацията причинява повишен поток на 24OHC от мозъка в цереброспиналната течност (CSF), докато дефектна кръвно-мозъчна бариера причинява увеличен поток на 27OHC от циркулацията в CSF. Изотопно разреждане-маса спектрометрията беше използвана за изследване на двата оксистерола в CSF и плазмата от повече от 250 пациенти с различни неврологични и гериатрични заболявания. Нивата на CSF на двата оксистерола бяха много по-засегнати от различните заболявания, отколкото плазмените нива.Пациентите с активни демиелинизиращи заболявания са имали повишени нива на 24OHC в CSF с относително високо съотношение 24OHC/27OHC.Пациентите с менингит като цяло са имали високи нива и на двата стероида с ниско съотношение 24OHC/27OHC.Пациентите с болестта на Алцхаймер са имали леко повишени нива на 24OHC в CSF с по-малко увеличение на 27OHC.Пациентите с множествена склероза са имали тенденция да имат по-високи нива на 24OHC по време на активни периоди с високо съотношение 24OHC/27OHC. Измерванията на двата оксистерола в CSF и плазмата могат значително да допринесат за съществуващите биохимични методи за оценка на неврологични заболявания.