Продукти

Активатори на карбоанхидраза: първото изследване на активирането на човешката секреторна изоформа VI с аминокиселини и амини.

Секреторният изоензим на човешката карбоанхидраза (hCA, EC 4.2.1.1), hCA VI, е клониран, експресиран и пречистен в бактериална експресионна система.Кинетичните параметри за реакцията на хидратиране на CO(2) доказват, че hCA VI притежава ak(cat) от 3,4 x 10(5)s(-1) и k(cat)/K(M) от 4,9 x 10(7)M (-1)s(-1) (при рН 7,5 и 20 градуса С).hCA VI има значителна каталитична активност за физиологичната реакция от същия порядък като повсеместната изоформа CA I или трансмембранния, свързан с тумор изоензим CA IX.Показано е, че серия от аминокиселини и амини действат като активатори на CA VI с различна ефикасност.l-His, l-Trp и допамин показват слаби CA VI активиращи ефекти (K(A)s в диапазона от 21-42 микроМ), докато d-His, d-Phe, l-DOPA, l-Trp, серотонин и някои пиридил-алкиламини са по-добри активатори, с K(A)s в диапазона от 13-19 микроМ.Най-добрите CA VI активатори са l-Phe, d-DOPA, l-Tyr, 4-амино-l-Phe и хистамин, с K(A)s в диапазона от 1,23-9,31 микроМ.Всички тези активатори повишават k(cat), като нямат ефект върху K(M), участвайки по този начин в скоростоопределящата стъпка в каталитичния цикъл, реакциите на пренос на протони между ензимното активно място и околната среда.