Продукти

Серин/треонин протеин фосфатазите са описани в много патогенни бактерии като основни ензими, участващи в зависимите от фосфорилирането пътища на сигнална трансдукция и често свързани с вирулентността на тези организми.Проверка на генома на Mycoplasma synoviae разкрива наличието на ген (prpC), кодиращ предполагаема протеинова фосфатаза от подсемейството протеинова фосфатаза 2C (PP2C).Тук ние докладваме пълна биохимична характеристика на M. synoviae фосфатаза (PrpC) и конкретната роля на металните йони във връзката структура-функция на този ензим.Анализът на аминокиселинната последователност на PrpC разкри, че всички остатъци, включени в двуядрения метален център и предполагаемите трети метални йон-координиращи остатъци, запазени в PP2C фосфатазите, присъстват в PrpC.PrpC е мономерен протеин, способен да дефосфорилира фосфо-субстрати със зависимост от Mn(2+) йони.Анализът на термичната стабилност демонстрира стабилността на ензима при леки температури и влиянието на Mn(2+) йони върху това свойство.Масспектрометричният анализ предполага, че три метални йона се свързват с PrpC, два от които с видима константа с висок афинитет.Мутационният анализ на предполагаемите трети метал-координиращи остатъци, Asp122 и Arg164, разкрива, че тези варианти показват по-слабо свързване на манганови йони и че и двете мутации засягат PrpC фосфатазната активност.Съгласно тези резултати, PrpC е член на зависим от метал протеин фосфатаза с подобрена стабилност в холоформата и с Asp122, вероятно замесен в третото място за свързване на метал, което е от съществено значение за каталитичната активност.