Продукти

Настоящото изследване описва прост и ефективен метод, използващ високоефективна течна хроматография (HPLC), съчетана с флуоресцентно откриване за определяне на кинетичните параметри на усвояването на глутамат в нервната тъкан.Тъканта на ретината, получена от 7-дневни пилета, се инкубира с известни концентрации на глутамат (50-2000 μM) в продължение на 10 минути и се измерват нивата на о-фталдехид (OPA)-дериватизиран невротрансмитер в инкубационната среда.Чрез оценка на разликата между началните и крайните концентрации на глутамат в средата се характеризира механизъм на насищане (K(m)=8.2 и V(max)=9.8 nmol/mg протеин/min).Тази мярка беше до голяма степен зависима от натрий и температура, силно подкрепяйки, че механизмът за намаляване на концентрацията наистина е поглъщане от транспортери с висок афинитет.В допълнение към това, нашите резултати също показаха, че цинковият хлорид (инхибитор на глутамат/аспартат транспортери) предизвиква зависимо от концентрацията намаляване на усвояването на глутама те, демонстрирайки спецификата на нашата методология.Като цяло, настоящата работа характеризира алтернативна методология за оценка на усвояването на глутамат в нервната тъкан с помощта на HPLC.Този подход може да бъде важен инструмент за проучвания, свързани с характеризирането на малки промени в транспорта на глутамат, свързани с увреждане на централната нервна система.