Продукти

Въпреки че етиологията на дегенерацията на междупрешленните дискове е слабо разбрана, един подход за предотвратяване на този процес може да бъде инхибиране на апоптозата.В настоящото проучване антиапоптотичните ефекти на карбоксиметилирания хитозан (CMCS) в клетките на нуклеус пулпозус (NP) бяха изследвани с цел да се подобри оцеляването на дисковите клетки.NP клетките на плъх се изолират и култивират in vitro и водороден пероксид (H2O2) се използва за изграждане на модел на апоптоза на NP клетки.Клетъчната жизнеспособност беше оценена с тест за клетъчно броене kit-8.Съотношението на апоптотичните клетки беше изследвано чрез анализ на двойно оцветяване с анексин V-флуоресцеин изотиоцианат (FITC) и пропидиев йодид (PI), а морфологията беше наблюдавана чрез оцветяване с Hoechst 33342.Потенциалът на митохондриалната мембрана на NP клетките се оценява чрез флуоресцентно оцветяване с родамин 123.Беше извършена количествена полимеразна верижна реакция (qPCR) на обратната транскрипция (RT) за измерване на нивата на mRNA на индуцируема азотен оксид синтаза (iNOS), каспаза-3, В-клетъчен лимфом (Bcl )-2, колаген тип II и агрекан.Беше извършен Western blot анализ за откриване на протеинови нива на iNOS и Bcl-2.Резултатите от оцветяването с анексин V-FITC/PI и Hoechst 33342 показват, че CMCS е в състояние да предотврати апоптозата на NP клетките по дозозависим начин.Оцветяването с родамин 123 изясни, че CMCS намалява увреждането на потенциала на митохондриалната мембрана в третираните с H2O2 NP клетки.Намалена каспаза-3 и повишена Bcl-2 активност бяха открити в CMCS-третирани NP клетки чрез RT-qPCR и Western blot анализ.CMCS също насърчава пролиферацията и секрецията на колаген тип II и агрекан в третирани с H2O2 NP клетки.Показано е, че CMCS е ефективен при предотвратяване на апоптотична клетъчна смърт in vitro, демонстрирайки потенциалните предимства на този терапевтичен подход при регулиране на дегенерацията на диска.